中西医诊疗白癜风区别 http://pf.39.net/bdfyy/zjft/150221/4580656.html“水产生物病害与防治”专栏
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题目
谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响
作者
沈海洋1,2,卢志杰1,2,秦真东2,赵丽娟2,李亚男2,刘春2,杨光1,2,叶成凯1,2,潘淦1*,林蠡2*
单位
1.华南师范大学生命科学学院,广东省水产健康安全养殖重点实验室,广东广州;
2.仲恺农业工程学院动物科技学院,广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心,广州市水产病害与水禽养殖重点实验室,广东广州
摘要
为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系,本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc),结果显示GF-1-C-Myc基因cDNA全长bp,开放阅读框(ORF)为bp,编码95个氨基酸(aa),有亮氨酸拉链结构域与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。实验表达和纯化了GF-1-C-Myc蛋白,并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示,缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒(NNV)的复制,添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制;此外,NNV感染可上调GF-1-C-Myc基因的表达,并显著消耗GF-1细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明,GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢,从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控NNV的感染提供了参考。
关键词
斜带石斑鱼;C-Myc基因;GF-1细胞;神经坏死病毒;感染;谷氨酰胺
文中图片
斜带石斑鱼GF-1细胞C-Myc的ORF核苷酸序列及氨基酸序列
斜带石斑鱼与其他鱼类的C-Myc蛋白氨基酸序列比对和预测的三维结构图
斜带石斑鱼与其他鱼类C-Myc基因的系统进化树
C-Myc基因的克隆电泳图
斜带石斑鱼GF-1-C-Myc蛋白表达、纯化与多克隆抗体制备
GF-1-C-Myc多克隆抗体的最终效价分析
C-Myc基因在GF-1细胞不同感染时间下的mRNA与蛋白表达
不同条件下谷氨酰胺含量变化的测定
NNV在含有谷氨酰胺与不含谷氨酰胺培养基中的感染情况
NNV衣壳蛋白在不同感染时间点的表达
谷氨酰胺对GF-1细胞中C-Myc基因表达的影响
文章引用格式
沈海洋,卢志杰,秦真东,等.谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响[J].水产学报.DOI:10./jfc..
ShenHY,LuZJ,QinZD,etal.RelationshipbetweentheexpressionofC-MycproteinandthereplicationofnervousnecrosisvirusinGF-1cellstreatedwithglutamine[J].JournaloffisheriesofChina.DOI:10./jfc..
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